产品简介
本产品主要用于蛋白电泳凝胶常规染色后的脱色,主要成分为无水乙醇和冰醋酸。可以作为XFBM1285 考马斯亮蓝染液试剂盒的补充试剂。
储存与运输
常温保存与运输;有效期12个月。
操作说明
常规染色脱色方法:
1. 电泳结束后,取出聚丙烯酰胺凝胶放入适量的考马斯亮蓝染液R250中,以染液刚好覆盖凝胶为宜。
2. 在水平摇床上室温染色4-12 h,也可以适当提高温度以减少染色时间。
3. 倒出染液,加入适量的考马斯亮蓝脱色液覆盖凝胶,室温下脱色4-12 h,直到凝胶背景干净,可以看到较清晰的深蓝色蛋白条带为止。期间需更换脱色液。
快速染色脱色方法:
1. 电泳结束后,取出聚丙烯酰胺凝胶先放入蒸馏水中润洗两次,加入适量的考马斯亮蓝染液R250(XFBM1286),以染液刚好覆盖凝胶为宜。放入微波炉中加热至接近沸腾,立即停止加热。若溶液煮沸容易导致凝胶破损碎裂。
2. 随后在染色液较高温度的情况下,水平摇床上染色5 min左右,直到能够看到清晰的蛋白条带为止。
3. 倒出染液,加入适量的考马斯亮蓝脱色液覆盖凝胶,放入微波炉中低火加热至接近沸腾,立即停止加热。同理,因溶液沸腾容易导致凝胶破损碎裂。
4. 在保持脱色液较高温度的情况下,水平摇床脱色20-30 min,期间可更换2-3次脱色液,经微波炉加热和摇动脱色,直到蓝色背景基本全部脱去,蛋白条带达到预期的染色结果为止。
5. 完成脱色后可将凝胶保存在水中或20%甘油水溶液中,尽快拍照。如需要长期保存可制备干胶。
注意事项
1. 考马斯亮蓝染液R250可回收反复使用。
2. 对于胶浓度小于10%的胶,操作时要小心,避免出现胶碎裂的情况。
3. 如使用快速染色脱色方法,因染色液及脱色液中含有乙醇,务必使用微波炉低火加热,注意安全。
4. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
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