琼脂糖氨基磁珠(SweMagrose NH2)
货号:109005 编号:XFBM1274
CAS号: 规格:琼脂糖氨基磁珠(SweMagrose NH2)
包装:1 mL 保质期:90天
保存条件:4℃冷藏保存
产品简介
磁分选技术可以便捷的分选或富集抗体、抗原、凝聚素、蛋白酶、核酸和细胞,同时保持其生物活性;琼脂糖氨基磁珠(Magrose NH2)采用高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料完美融合在一起,最终制成一种超顺磁性氧化铁微球的悬浮液,表面包被氨基;相较于传统磁珠,Magrose NH2具有更快的磁响应性、良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点;Magrose NH2可以在特殊试剂(如戊二醛)的作用下高效地与多种生物配体(寡核苷酸、多肽、蛋白、药物分子等)进行高载量结合,是进行包被、吸附、化学改性等后续处理的良好基础材料。
结合位点丰富:加强与配体的特异性结合;
高磁响应性:磁响应更快,节省实验时间;
超顺磁性:外界磁场消失后依旧能保持良好的分散性;
优异的分散性和重悬性:良好的分散性和重悬性保证了实验的稳定性,操作更为便捷;
物理化学稳定性优良:实验重复性效果更有保障。
产品信息
产品类型Magrose NH2
平均粒径30~150 μm
表面氨基含量60 μmol/mL gel
保存液20%乙醇溶液
磁核Fe3O4
壳层琼脂糖
磁性类型超顺磁性
储存与运输
常温运输;2-8℃保存,有效期24月。
操作步骤(以偶联蛋白G为例)
1. 自配试剂准备:
PBS溶液(pH 7.4):2.7 mM KCl,2.0 mM KH2PO4,137 mM NaCl,10 mM Na2HPO4,pH 7.3-7.5@25℃(推荐XFBM963-100ML);
0.1 M碳酸盐缓冲液(pH 9.6):分别配制0.1 M碳酸钠和0.1 M碳酸氢钠溶液,用0.1 M碳酸氢钠溶液调节0.1 M碳酸铵溶液的pH到9.6;
戊二醛溶液:25%戊二醛水溶液45 μL加入到55 mL 0.1 M碳酸盐缓冲液(pH 9.6)中混匀;
2. 磁珠预处理:混匀琼脂糖氨基磁珠(Magrose NH2)后,取100 μL到1.5 mL EP管中,置于磁分离架上磁吸分离30 s,用500 μL PBS溶液(50 mM PBS,pH 7.4)洗3次,磁吸分离吸除上清;
3. 戊二醛活化:加入新鲜配制的100 μL戊二醛溶液(25%戊二醛45 μL+55 mL pH=9.6 0.1 M碳酸盐缓冲液)到EP管中,漩涡混匀使磁珠充分悬浮,用锡箔纸包裹后25°C活化1h(反应避光,以避免戊二醛自身发生聚合),该期间请保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混匀仪进行颠倒混匀);
4. 活化后洗涤:磁珠活化后,磁吸去上清,使用PBS缓冲液清洗3次;
5. 磁珠偶联:向装有磁珠的EP管中加入50~200 μg蛋白(浓度及用量需根据实验具体情况进行优化,这里推荐使用0.1 M碳酸盐缓冲液(pH 9.6)并加入0.05% Tween-20提高分散性),轻柔混匀,用锡箔纸包裹后25°C反应3h(反应注意避光),或者25°C反应 1 h后4℃偶联过夜,偶联期间保持磁珠悬浮状态;
6. 偶联后封闭:将EP管置于磁分离架上去除上清,加入500 μL封闭液(可以使用5%(w/v) BSA溶解于PBS溶液中,如100 mL PBS溶液中溶解5 g BSA),25°C反应1h,期间保持磁珠悬浮状态;
7. 保存:磁吸去上清,用200 mL PBS或保存液清洗三次后,根据实际需要控制磁珠浓度,保存于4℃,必要时可加入0.02%(w/v)叠氮化钠。
注意事项
1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 本产品保存在20%乙醇中,使用前用纯水或缓冲液洗涤磁珠2-3次,以去除保存液中的乙醇。
3. 使用本产品前请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。
4. 使用时需选择配套的磁力架。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
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