琼脂糖羧基磁珠(SweMagrose COOH)
货号:108995 编号:XFBM1269
CAS号: 规格:琼脂糖羧基磁珠(SweMagrose COOH)
包装:1 mL 保质期:90天
保存条件:4℃冷藏保存
产品简介
磁分选技术可以便捷的分选或富集抗体、抗原、凝聚素、蛋白酶、核酸和细胞,同时保持其生物活性;琼脂糖羧基磁珠(Magrose COOH)采用高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料完美融合在一起,最终制成一种超顺磁性氧化铁微球的悬浮液,表面包被羧基;相较于传统磁珠,Magrose COOH具有更快的磁响应性、良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点;Magrose COOH可以在特殊试剂(如EDC)的作用下高效地与多种生物配体(寡核苷酸、多肽、蛋白、药物分子等)进行高载量结合,是进行包被、吸附、化学改性等后续处理的良好基础材料。
结合位点丰富:加强与配体的特异性结合;
高磁响应性:磁响应更快,节省实验时间;
超顺磁性:外界磁场消失后依旧能保持良好的分散性;
优异的分散性和重悬性:良好的分散性和重悬性保证了实验的稳定性,操作更为便捷;
物理化学稳定性优良:实验重复性效果更有保障。
产品信息
产品类型Magrose COOH
平均粒径30~150 μm
表面羧基含量60 μmol/mL gel
保存液20%乙醇溶液
磁核Fe3O4
壳层琼脂糖
磁性类型超顺磁性
储存与运输
常温运输;2-8℃保存,有效期24月。
操作步骤(以偶联蛋白G为例)
A. 自配试剂准备:
MEST溶液:MES(2-吗啉乙磺酸) 100 mM,0.05% Tween 20,氢氧化钠调pH 5.0;
EDC(碳二亚胺)溶液:EDC 10 mg/mL溶解于MEST溶液;
NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)溶液:NHS 10 mg/mL溶解于MEST溶液;
B. 磁珠表面羧基活化:
1. 混匀琼脂糖羧基磁珠(Magrose COOH)后,取100 µL到1.5 mL EP管中,置于磁分离架上磁吸分离30 s,去除上清液,用200 µL MEST溶液进行磁吸分离洗涤2次,然后吸除上清液;
2. 迅速加入新鲜配制的100 µL EDC溶液和100 µL NHS溶液到装有磁珠的离心管中,漩涡混匀使磁珠充分悬浮,25℃活化30 min,该期间请保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);经过上述步骤之后,磁珠表面的羧基已经活化,可以与带有伯氨基的生物配体进行共价偶联(活化状态不宜长时间保存,建议立即进行偶联);
C. 磁珠与生物配体的共价偶联:
1. 磁吸分离吸除上清液,加入50~200 µg生物配体(用量、浓度及缓冲液类型需要根据具体实验进行优化,配体缓冲液可参考如下几种:100 mM 2-吗啉乙磺酸缓冲液,pH 4.8;200 mM碳酸氢钠缓冲液,pH 8.3;50 mM硼酸盐缓冲液,pH8.5;100 mM磷酸盐缓冲液;100 mM氯化钠溶液,pH 7.4等;缓冲液中可加入0.05% Tween 20以提高磁珠分散性,避免缓冲体系中存在除生物配体以外含有伯氨基的试剂),轻柔地混匀;
2. 25℃偶联2 h或25℃偶联1 h后放置4℃静置过夜,偶联期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
3. 离心管置于磁分离架上磁吸分离吸除上清液,加入200 µL PBST溶液(pH 7.2,且含1% BSA)重悬磁珠(可根据需要进行超声),25℃反应1 h封闭磁珠表面未反应的活化羧基基团,该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
4. 离心管置于磁分离架上磁吸分离吸除上清液,每次用200 µL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗涤3次后,重新悬浮于保存溶液中(可根据需要来确定保存溶液的加入量,以调整偶联配体磁珠的浓度),保存于4℃;如果固定的生物配体稳定,可以在保存溶液中加入0.02%(w/v)叠氮化钠(NaN3)作为抑菌剂。
注意事项
1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 本产品保存在20%乙醇中,使用前用纯水或缓冲液洗涤磁珠2-3次,以去除保存液中的乙醇。
3. 使用本产品前请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。
4. 使用时需选择配套的磁分离架。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
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