BCA蛋白定量检测试剂盒

货号:108810 编号:XFBM1152

CAS号: 规格:BCA蛋白定量检测试剂盒

包装:200 T 保质期:90天

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"目前最常用的蛋白浓度定量检测方法有两种,即Bradford法和BCA法。BCA法定量检测蛋白的基本原理是基于双缩脲反应,即在碱性条件下,Cu2+被蛋白质还原成Cu+,随后Cu+与BCA(Bicinchonic acid,一种显色剂)发生螯合反应,每两分子BCA螯合一个Cu+,生成紫色的水溶性复合物,该物质在562 nm处有最高吸收值,且颜色深浅与蛋白质浓度一定范围内成正比,因此可用于蛋白质的定量检测,蛋白浓度在50-2000 μg/mL浓度范围内有较好的线性关系。
本方法不受绝大部分样品中化学物质的影响,可以兼容样品中高浓度的去垢剂,包括浓度高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween-20、60、80等。但螯合剂和高浓度还原剂会影响检测结果,需确保样品中无EGTA,EDTA浓度低于10 mM,DTT低于1 mM,β-巯基乙醇低于1 mM。如样品中含有螯合剂或还原剂,可考虑本公司其他产品XFBM1153 Bradford法蛋白定量检测试剂盒。
试剂盒组成
Component200T1000T
BCA试剂40 mL2×100 mL
硫酸铜溶液1.2 mL5×1.2 mL
蛋白标准品(BSA)25 mg5×25 mg
蛋白标准配制液1.5 mL5×1.5 mL
储存与运输
整套试剂可常温运输;蛋白标准品(BSA)2-8℃保存,有效期12个月。配制成蛋白标准溶液后需-20℃保存,并在6个月内使用。其余试剂常温保存,有效期12个月。
注意事项
1. BCA法测定蛋白浓度受温度和时间的影响较大,吸光度值会随着时间的延长或温度升高而变化,如果不能精确控制显色反应的时间和温度,建议每次测定都需要做标准曲线。
2. 在进行蛋白标准贮备液的配制时,需确保溶解充分。稀释配制蛋白标准工作液时建议10倍梯度稀释,不要一次稀释50倍,以免产生较大误差。
3. 为保证蛋白的精确定量,样品的提取和蛋白标准品的稀释配制最好选用相同的缓冲液,同保证两者检测条件一致。如果缓冲液本身就有较高的背景值,建议使用其他的方法测定。
4. BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃温浴使其溶解,不影响使用。
5. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!"



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