外泌体标记与示踪试剂盒（PKH 26荧光法）
货号：108768 编号：XFBM1109
CAS号： 规格：外泌体标记与示踪试剂盒（PKH 26荧光法）
包装：20 T 保质期：90天
保存条件：4℃冷藏保存
一种以PKH26为荧光探针快速灵敏地标记外泌体，以用于外泌体示踪研究的试剂盒。还可用于细胞膜的标记。其激发为556 nm，发射波长为567 nm。可搭配先丰纳米Hoechst 33342（XFBM1080-1ML）染料标记细胞核，与细胞核共定位，效果更好，结果更直观。
产品描述
Exosome（外泌体）是由活细胞分泌的直径约为30-150nm的小囊泡，存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
Exosome具有典型的脂质双分子层结构，本试剂盒是一种利用红色荧光探针PKH 26对外泌体细胞膜进行标记和示踪的试剂盒，当探针与外泌体细胞膜脂质区结合时发出红色荧光，其激发为556 nm，发射波长为567 nm。此外也可用于细胞的体外标记、增殖、示踪研究。
储存与运输
干冰(Dry ice)运输；-80℃保存；6个月有效。
组成
ComponentXFBM1109-20T
PKH 26（1000×）20 μL
PKH 26稀释缓冲液25 mL
操作步骤
一、 外泌体染色
1. 提取、纯化外泌体，推荐按照本公司的外泌体分离层析柱（XFBM1123、XFBM1124）。
2. 检测外泌体粒径、浓度，推荐使用NTA检测。
3. 将1 mL 1×1011 Particles/mL的外泌体加入1 μLPKH 26（1000×）染料，混合均匀。
4. 室温孵育5 min，加入1%的BSA终止染色并吸附多余染料。
5. 再次通过外泌体分离层析柱（XFBM1123）纯化去除多余染料后可用于后续实验（染色后的外泌体可4℃存放过夜）。
二、 细胞染色
1. 1×PKH 26染色液配制：取1 μL PKH 26（1000×）与1000 μL PKH 26稀释缓冲液充分混匀，配制成1×PKH 26染色液备用（PKH 26探针推荐使用浓度1×-1.5×）。
2. 正常或实验组细胞，用PBS洗涤2-3次。
3. 加入1 mL 1×PKH 26染色液，室温避光孵育5 min（不同细胞孵育时间存在差异，可在5-30 min范围内调整）。
4. 加入等体积灭活的血清或1% BSA结合多余的染料，室温等待1 min。（可选）
5. 用完全培养基洗涤2-3次。
6. 可用荧光显微镜直接观察，选择DsRed通道；或重悬细胞后用流式细胞仪检测，选择PE通道（Ex/Em：556/567 nm）。
注意事项
1. 如每次使用的PKH 26探针较少，请视情况分装，尽量避免PKH 26探针反复冻融，-80℃避光保存。
2. PKH 26工作液应现配现用，不能提前配制，否则将影响染色效果。
3. 不同细胞标记后可以示踪的代数和时间差异较大，可根据实际情况或者参考文献进行检测。
4. PKH 26染色前不可固定和通透，染色后可用中性甲醛固定和0.5%的Saponin通透。
5. 悬浮细胞染色时，推荐细胞密度是0.8~1.5×106个/mL。
6. 本产品对光敏感，操作过程尽量避免强光接触。
7. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
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