Mito-Tracker Green（线粒体绿色荧光探针)
货号：108764 编号：XFBM1105
CAS号： 规格：Mito-Tracker Green（线粒体绿色荧光探针)
包装：50 μg 保质期：90天
保存条件：4℃冷藏保存
产品描述
Mito-Tracker Green，是一种线粒体特异性绿色荧光探针，最大激发光波长为490 nm，最大发射波长为516 nm，可用于活细胞线粒体特异性荧光染色，也可用于染色前后固定和通透的细胞，但固定通透染色效果会略有下降。染料产生的荧光信号即使在醛固定和洗涤剂通透（推荐使用0.5% Saponin）后仍能保留在线粒体中。Mito-Tracker Green 探针可用于流式检测和荧光显微镜检测。
储存与运输
冰袋(Wet ice)运输；-20℃避光保存，6个月有效。
试剂盒组成
ComponentXFBM1105-50UG
Mito-Tracker Green（线粒体绿色荧光探针)50 μg
说明书1 份
操作步骤
1 检测工作液配制：
1.1 本产品为50 μg粉末，实验前短暂低速离心，确保粉末沉置管底；
1.2 加入74 μL高质量无水DMSO完全溶解，配置成1 mM的储存液；
1.3 用不含血清的培养基，稀释成20 nM-200 nM的线粒体检测工作液（推荐使用100 nM）。
2 细胞染色（以下为贴壁细胞方案，悬浮细胞换液需要离心操作）：
2.1 正常或处理过后的细胞，用不含血清的培养基洗涤2-3次；
2.2 加入预热的线粒体检测工作液，37℃避光孵育30 min（不同细胞可以调整检测液的浓度和孵育时间）；
2.3 去除探针，用不含血清的培养基洗涤2-3次；
2.4 荧光显微镜用GFP通道观察或流式用FITC检测。
3 细胞固定和穿孔以及其他操作（可选）：
注意：本产品染色前后均可以进行固定、穿孔等操作，但荧光信号均会衰减；
3.1 细胞染色前固定和通透
3.1.1 正常或处理过后的细胞，加入PBS缓冲液洗涤2-3次，加入4%多聚甲醛（推荐XFBM1064），室温固定10 min；
3.1.2 去除固定液，用PBS缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
3.1.3 将固定、洗涤过后的细胞，加入0.5% Saponin，室温通透10 min；
3.1.4 去除通透液，用PBS缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
3.1.5 细胞经固定、穿孔处理后，可以用于染色。
3.2 细胞染色后固定通透
3.2.1 将染色、洗涤处理过后的细胞，2.5%戊二醛（推荐XFBM1121），室温固定10 min；
3.2.2 去除固定液，用PBS缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
3.2.3 将固定、洗涤过后的细胞，加入0.5% Saponin，室温通透10 min；
3.2.4 去除通透液，用PBS缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
3.2.5 细胞经染色后固定通透，可以用于后续多标等实验。
注意事项
1. 首次配置储存液后，建议分装后使用，避免反复冻融。
2. 高浓度的探针会产生假阳性和线粒体毒性，以及可能会染上其他的细胞结构；
3. 血清中的氧化酶会影响探针的活性，避免使用含有血清的试剂。
4. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
5. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
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