产品描述
MitoTracker Red CMXRos（线粒体红色荧光探针）是一种X-rosamine的衍生物，分子量为531.52，激发波长为578±3 nm，发射波长599±4 nm。该染料可以直接进入活细胞，并定位于线粒体上，且能够与线粒体共价结合。其特异性标记线粒体的原理为带正电荷的探针骨架，可将探针定位于带负电荷的线粒体上，而探针上的氯甲基基团可以与线粒体中的游离巯基共价结合，起到荧光标记的作用；只需简单的将其同活细胞共同孵育一定的时间，即可标记细胞线粒体，且在线粒体标记后，能够进一步经固定和穿孔等处理，用于后续多标实验。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输；-20℃避光保存，12个月有效。
试剂盒组成
ComponentXFBM1099-50UG
MitoTracker Red CMXRos（线粒体红色荧光探针）50 μg
产品说明书1 份
操作步骤
1 检测工作液配制：
1.1 注意，本产品为干粉形式，使用前需短暂高速离心，确保干粉沉至管底。自备细胞级DMSO。
1.2 配制储存液：向管内加入94μL DMSO（细胞级），吹吸混匀，使染料充分溶解，即得到浓度为1 mM的线粒体荧光染料储存液（产品标签上有分子量信息），然后离心机短暂高速离心，避免试剂挂壁损失。储存液-20℃保存，建议分装成更小规格保存，避免反复冻融。
1.3 配制检测工作液：如果是染色后直接进行检测，将储存液用生物缓冲液（Hanks、PBS）或不含血清的基础培养基，稀释成终浓度为0.1-0.25 μM的线粒体检测工作液；如果染色后需要进行固定穿孔等后续操作，将储存液用生物缓冲液（Hanks、PBS）或不含血清的基础培养基，稀释成终浓度为0.4-0.6 μM的线粒体检测工作液；
2 细胞染色（以下为贴壁细胞方案，悬浮细胞换液需要离心操作）：
2.1 将细胞种于细胞培养板或者细胞爬片上，待其汇聚至一定程度；
2.2 吸除细胞培养液，用预热的缓冲液清洗1-2次，每次3-5 min；
2.3 加入预热的线粒体检测工作液，于细胞培养箱中，37℃孵化30 min（由于细胞种类和状态不同，可以对孵化时间进行一定的调整）；
2.4 去除孵化液，用缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
2.5 直接或用抗荧光淬灭封片液（推荐XFBM1086）封片后于荧光显微镜下观察（Ex=579 nm，Em=599 nm）；
3 细胞固定和穿孔以及其他操作（可选）：
注意：本产品染色后，可以进行固定、穿孔等操作，但是固定后荧光信号会衰减。
3.1 细胞固定
3.1.1 将经线粒体荧光染料标记染色并洗涤处理过后的细胞，加入固定液（推荐XFBM1064），室温固定10 min；
3.1.2 去除固定液，用缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
3.2 细胞穿孔
3.2.1 将固定、洗涤过后的细胞，加入0.2-0.5% Triton X-100，室温穿孔10 min；
3.2.2 去除穿孔液，用缓冲液清洗2-3次，每次3-5 min；
3.3 细胞经染色后固定、穿孔处理后，可以用于接下来的多标等实验。
注意事项
1. 由于细胞的种类和状态不同，染料的工作浓度以及孵化的时间，可以进行适当调整。
2. 该染料需要活细胞状态下，进行线粒体定位，不可先固定细胞，否则会导致定位不准的假阳性结果。可以在活细胞染色后进行固定以及后续操作。
3. 在对活细胞进行染色和洗涤时，检测工作液和洗涤缓冲液需37℃预热，染色及洗涤通过在培养箱中孵育完成，以免温差刺激影响细胞形态。
4. 为了防止荧光淬灭，整个染色过程需避光操作。
5. 探针母液需分装保存，避免反复冻融；为了避免浪费，染色工作液按需配制，现配现用。
6. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
声明：我司保证技术报告中的信息的准确性，但不保证材料的普适性，也不负责由此导致的任何损失。提供的参数为统计数据，允许少量浮动。且我司提供的技术报告都是面向所有客户，报告中的表征图片请勿擅自截图使用。
Disclaimer: XFNANO LLC believes that the information in this Technical Data Sheet is accurate and represents the best and most current information available to us. XFNANO Material makes no representations or warranties either express or implied, regarding the suitability of the material for any purpose or the accuracy of the information contained within this document. Accordingly, XFNANO Material will not be responsible for damages resulting from use of or reliance upon this information. Please do not use screenshots of any characteristic graphs in this report without permission.
快递服务
江浙沪皖用户邮费为10元，其他地区用户邮费为20， 国际运费请咨询sales@xfnano.com。购买满 500.0 元免运费。如果库存显示为0， 请电话或邮件和销售确认，免费热线电话：400 025 3200邮件：sale@xfnano.com 感谢您的支持！
推荐商品
