Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒
货号：107026 编号：XFBM195
CAS号： 规格：活细胞染色
包装：500次 保质期：360天
保存条件：-20°C 避光保存
1. 产品描述
Calcein, AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂， 它穿透细胞 膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Calcein， 从而被滞留在细胞内， 发出强 绿色荧光。与其它同类试剂（如 BCECF, AM 和 CFDA）相比，Calcein, AM 的细 胞毒性很低。 Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。
Calcein, AM 仅对活细胞染色。作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞 膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核， 并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而 产生红色荧光（激发： 535 nm， 发射： 617 nm） ，因此 PI 仅对死细胞染色。由 于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞 和死细胞。用 545 nm 激发，仅可观察到死细胞。
由于不同细胞系的最佳染色条件不同， 我们建议个别确定 Calcein, AM 和 PI 的合适浓度。
2. 产品内容
组分 | 500 次 | 1000 次 | 保存条件及保质期 |
Calcein.AM 干粉 | 200ug | 400ug | -20℃干燥避光 有效期一年。 |
PI 存储液(1.5 mmol/l) | 200ul | 400ul | |
DMSO | 200ul | 400ul |
注：500 次、1000 次是指 Calcein-AM 的工作液浓度为 2umol/l，PI 的工作液浓度为 4.5umol/l， 且每次用量为 100ul 染色工作液时，可以检测的次数。
3. 染色过程
（1） 配制 1mmol/l 的 Calcein-AM 储存液。将 200ul DMSO 加入到含 200ug Calcein-AM 粉末的管中， 用移液器吹打溶解。储存液避光保存， 尽快使用， 避
免反复冻融。
（2） 将 Calcein-AM 储存液和 PI 储存液恢复至室温后使用。使用 PBS 缓冲液 配制工作液。
*Calcein-AM 工 作 液 的 推 荐 浓 度 为 2umol/l ， PI 工 作 液 的 推 荐 浓 度 为
4.5umol/l。
*根据细胞不同，需求不同，可自行调整工作液浓度。
*配制好的染色工作液，最好现配现用。
（3） 取 100 ul 染色工作液与 200ul 细胞悬液混合，在 37℃培养 15 min。
（4） 在 490±10 nm 激发波长下同时观察黄绿色荧光的活细胞和红色荧光的死 细胞。另外用 545 nm 激发波长单独观察死细胞。
注意事项：PI 对人体有刺激性，请注意适当防护。
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