4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐DAPI

货号:106953 编号:XFBM160

CAS号:28718-90-3 规格:4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

包装:10mg 保质期:360天

保存条件:-20°C 避光保存

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DAPI-4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐DAPI


CAS#28718-90-3

中文名4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

英文名4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

结构式

分子式C16H17Cl2N5

分子量350.25

性质

1. 外观:黄色粉末

2. 纯度:≥95% (HPLC)

3. 产品描述:

DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNAmicroplasm DNA以及染色体DNADAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm460nm

4. 染色过程

1 1mL ddH2ODAPI溶解,制得2.9mMDAPI溶液(1mg DAPI/1mL H2O)。

注:DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解,需要先用水将其溶解。

2 取适量DAPI水溶液加到PBS中,制备成1050µMDAPI溶液。推荐以下PBS的配制方法:

8.0g NaCl0.2g KCl2.9g Na2HPO4·12H2O0.2g KH2PO4溶解于1L纯水中。

3 1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以用1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。

4 37培养细胞1020分钟。

5 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

6 用带有360nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

储存条件-20干燥避光保存,有效期一年。

注意事项:

DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

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DAPI染色液

CAS#28718-90-3

中文名:4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

英文名4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

结构式

 

 

 

分子式:C16H17Cl2N5

分子量350.25

浓度:5mM solution in H2O

性质

1. 外观:黄色液体

2. 纯度:≥95% (HPLC)

3. 产品描述:

DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下得双链DNA染色。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNAmicroplasm DNA以及染色体DNADAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm460nm

DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

4. 使用方法

1)取适量 DAPI 水溶液加到 PBS 中,制备成 5-15 μg/ml  DAPI 溶液,推荐以下PBS的配制方法:将8.0g NaCl0.2g KCl2.9g Na2HPO4·12H2O0.2g KH2PO4溶解于1L纯水中。

2 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。

3 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。

4 室温放置510分钟。

5 吸除DAPI染色液,用TBSTPBS或生理盐水洗涤23次,每次35分钟。

6 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。

储存条件-20℃避光保存,有效期一年。

注意事项:

DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

 



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