4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐DAPI
货号:106953 编号:XFBM160
CAS号:28718-90-3 规格:4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐
包装:10mg 保质期:360天
保存条件:-20°C 避光保存
DAPI-4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐DAPI
CAS#:28718-90-3
中文名:4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐
英文名:4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride
结构式:

分子式:C16H17Cl2N5
分子量:350.25
性质:
1. 外观:黄色粉末
2. 纯度:≥95% (HPLC)
3. 产品描述:
DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。
4. 染色过程
(1) 用1mL ddH2O将DAPI溶解,制得2.9mM的DAPI溶液(1mg DAPI/1mL H2O)。
注:DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解,需要先用水将其溶解。
(2) 取适量DAPI水溶液加到PBS中,制备成10~50µM的DAPI溶液。推荐以下PBS的配制方法:
将8.0g NaCl、0.2g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4溶解于1L纯水中。
(3) 将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以用1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。
(4) 在37℃培养细胞10~20分钟。
(5) 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(6) 用带有360nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
注意事项:
DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
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DAPI染色液
CAS#:28718-90-3
中文名:4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐
英文名:4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride
结构式:

分子式:C16H17Cl2N5
分子量:350.25
浓度:5mM solution in H2O
性质:
1. 外观:黄色液体
2. 纯度:≥95% (HPLC)
3. 产品描述:
DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下得双链DNA染色。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。
本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
4. 使用方法
(1)取适量 DAPI 水溶液加到 PBS 中,制备成 5-15 μg/ml 的 DAPI 溶液,推荐以下PBS的配制方法:将8.0g NaCl、0.2g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4溶解于1L纯水中。
(2) 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。
(3) 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。
(4) 室温放置5~10分钟。
(5) 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2~3次,每次3~5分钟。
(6) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
储存条件:-20℃避光保存,有效期一年。
注意事项:
DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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