

细胞膜染色Dir
货号:105742 编号:XFBM191
CAS号: 规格:分子量:1013.39
包装:10mg 保质期:365天
保存条件:4℃冷藏避光密封保存

产品描述
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。
表1. DiD,DiO,DiI,DiR,DiS的化学性质
目录号 | 产品名称 | 规格 | 分子量 | Ex/Em | 推荐滤光器* |
DiD | |||||
XFBM173 | DiD labeling solution | 10 mL | 959.91 | 644/663 nm | XF47-Omega, 31023-Chroma |
DiO | |||||
XFBM183 | DiOC2(3) iodide | 100 mg | 460.31 | 484/501 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
XFBM184 | DiOC3(3) iodide | 100 mg | 488.32 | 482/497 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
XFBM185 | DiOC7(3) iodide | 100 mg | 600.57 | 482/504 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
XFBM186 | DiOC16(3) perchlorate | 25 mg | 825.6 | 484/501 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
XFBM187 | DiOC5(3) iodide | 100 mg | 544.47 | 482/504 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
XFBM188 | DiOC6(3) iodide | 100 mg | 572.52 | 482/504 nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
XFBM190 | DiO perchlorate | 100 mg | 881.7 | 484/501nm | XF23-Omega, 31001-Chroma |
DiI | |||||
XFBM174 | DiIC12(3) perchlorate | 100 mg | 765.55 | 549/565 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
XFBM176 | DiIC16(3) perchlorate | 100 mg | 877.76 | 549/565 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
XFBM177 | DiIC18(3)-DS | 50 mg | 993.53 | 555/570 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
XFBM178 | DiIC18(5)-DS | 50 mg | 1019.57 | 650/670 nm | XF47-Omega, 31023-Chroma |
XFBM179 | DiIC1(5) iodide | 100 mg | 510.45 | 638/658 nm | XF47-Omega, 31023-Chroma |
XFBM180 | DiI iodide | 100 mg | 961.32 | 549/565 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
XFBM181 | DiI perchlorate | 100 mg | 933.87 | 549/565 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
XFBM182 | DiI triflate | 100 mg | 983.48 | 549/565 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
DiR** | |||||
XFBM191 | DiR iodide | 10 mg | 1013.39 | 748/780 nm | XF112-Omega, 41009-Chroma |
DiS | |||||
XFBM192 | DiSC2(3) | 25 mg | 492.44 | 560/571 nm | XF32-Omega, 31002-Chroma |
XFBM193 | DiSC3(5) | 100 mg | 546.53 | 660/675 nm | XF47-Omega, 31023-Chroma |
* Omega滤光器由Omega公司提供(www. omegafilters.com);Chroma滤光器由Chroma公司提供(www. chroma.com)。
**DiR的发射波长肉眼不可见,所以需要配备CCD镜头或其他的近红外检测仪器。
使用方法
1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
注意:未使用的储存液保存在-20°C,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2. 悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3. 粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式细胞仪的检测
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。




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